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植物花青苷ELISA 檢測試劑盒 使用說明書-南京草本源

2016年09月05日 08:18:54人氣:190來源:南京草本源生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞植物花青苷ELISA 檢測試劑盒,ELISA 檢測試劑盒,試劑盒,進口試劑盒,國產(chǎn)試劑盒
【資料簡介】

本 試 劑 盒 只 能 用 于 科 學(xué) 研 究 , 不 得 用 于 醫(yī) 學(xué) 診 斷
植物(Plant)花青苷(Anthocyanin)
ELISA 檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被花青苷(Anthocyanin)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的花青苷(Anthocyanin)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。
4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,zui終結(jié)果乘以 5 才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻
試劑盒組成
名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注
微孔酶標板 12 孔×8 條 12 孔×4 條 無 標準品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 無 * 6mL 3mL 無 檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無 20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進行稀釋 底物 A 6mL 3mL 無 底物 B 6mL 3mL 無 終止液 6mL 3mL 無 封板膜 2 張 2 張 無 說明書 1 份 1 份 無 自封袋 1 個 1 個 無 注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、10、20、40、80、160 mg/L
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本 10μL,再加* 40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的
結(jié)果判斷
繪制標準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于 1.0 mg/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
 

南京草本源生物科技有限公司   各類試劑盒優(yōu)惠銷售,提供免費代測服務(wù)!洽談。

南京草本源生物科技有限公司作者

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