大桥久未无码吹潮在线观看,公与2个熄乱理在线播放,蜜桃AV噜噜一区二区三区,天美传媒MV免费观看

技術中心

人血小板活化因子PAF試劑盒原理分析

2015年01月29日 14:34:43人氣:430來源:上海谷研實業(yè)有限公司

資料類型jpg文件資料大小165021
下載次數(shù)129資料圖片 【點擊查看】
上 傳 人上海谷研實業(yè)有限公司 需要積分0
關 鍵 詞人血小板活化因子PAF試劑盒原理分析
【資料簡介】

人血小板活化因子PAF試劑盒原理分析

本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

試驗原理:
人血小板活化因子PAF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知PAF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PAF和標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PAF的濃度呈比例關系。

自備材料

. 蒸餾水。

2. 加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200、500ul、000ul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9. 人血小板活化因子PAF按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,000×g離心0分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---000×g離心0分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。

4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鐘。避免光照。

8. 人血小板活化因子PAF取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。

9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限

6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能

. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。

3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于0%。

結 果 判 斷 與 分 析

、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的PAF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的PAF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-80ng/ml

4、敏感度: 0. ng/ml

上海谷研實業(yè)有限公司作者

上一篇:97K130-1 ZP型消聲器、ZW型消聲彎管

下一篇:K101-1-4 通風機安裝(2012年合訂本)


我要投稿
  • 投稿請發(fā)送郵件至:(郵件標題請備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯(lián)系電話0571-87759680
環(huán)保行業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)+”服務平臺
環(huán)保在線APP

功能豐富 實時交流

環(huán)保在線小程序

訂閱獲取更多服務

微信公眾號

關注我們

抖音

環(huán)保在線網(wǎng)

抖音號:hbzhan

打開抖音 搜索頁掃一掃

視頻號

環(huán)保在線

公眾號:環(huán)保在線

打開微信掃碼關注視頻號

快手

環(huán)保在線

快手ID:2537047074

打開快手 掃一掃關注
意見反饋
色屁屁一区二区三区视频国产| 精品香蕉一区二区三区| 在线观看的AV网站| 久久国产香蕉一区精品| 日韩精品免费一级视频| 日韩 欧美 国产一区二区| 我是爸爸的女人中字头| 成人免费无码大片A毛片抽搐色欲| BGMBGMBGM老妇视频| 久久网站热最新地址| 曰韩少妇内射免费播放| 精品国产AV色欲果冻传媒| 久久精品国产在热久久| 中文在线а天堂中文在线新版| 国产三级在线精品区| 人妻无码第一区二区三区| 日韩一级毛大片| 日本三级2018亚洲视频| 韩国漫画免费观看| aa级欧美大片在线观看| 免费看18禁止观看黄网站| 欧美国产综合区欧美视频| 欧美成人一区在线播放| 亚洲中文字幕无码午夜| 亚洲AV中文无码字幕色最| 欧美一区二区三区四区乱码| 男人天堂久久久久| 中文字幕日韩精品一区| 国产精品欧美一区二区三区不卡| 欧美18禁一区二区三区| 久久精品国产69国产精品亚洲| 两个人免费完整版在线观看视频| 久久久久99精品国产片| 亚洲欧美一区二区三区| 中国凸偷窥XXXX自由视频| 国产一区二区在线观看免费观看| 玩弄人妻少妇500系列视频| 歪歪漫画-韩漫首页免费观看| 亚丝娜彩本无遮挡h里番| 亚洲深深色噜噜狠狠爱网站 | 国产日韩欧美小视频|