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IgG飽和硫酸銨鹽析法 進口原裝

2013年05月08日 16:31:22人氣:629來源:北京雅安達生物技術(shù)有限公司

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【資料簡介】

  IgG飽和硫酸銨鹽析法

 

 

IgG(免疫球蛋白g)的分子量為150~160kDa,含量為血清的1.5%~1.8%,約占血清蛋白總量的17%,血清中免疫球蛋白總量的75%~
80%.19G是人類血清中zui重要的抗體,在體液免疫中起著“主力免疫”的作用[1IgG的純化方法根據(jù)IgG的不同特性,IgG的純化方法主要有以下方法:
飽和硫酸銨鹽析法
鹽析法是粗分離蛋白質(zhì)的重要方法之一.因為蛋白質(zhì)分子吸附某種鹽離子后,其帶電表層使蛋白質(zhì)分子彼此排斥,而蛋白質(zhì)分子與水分子間的相互用卻加強,因而溶解度提高.但當大量中性鹽加入,使水的活度降低,進而導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和,水化膜逐漸被破壞,zui終引起蛋白質(zhì)分子間相互聚集并從溶液中析出.硫酸銨是鹽析zui常用的無機鹽,其主要特點是溶解度大,隨溫度變化。粚Φ鞍踪|(zhì)有保護作用,高濃度時可抑制微生物和蛋白酶的活性;溶解于水時不產(chǎn)生熱量,價格低廉,但在堿性環(huán)境中不能用硫酸銨作為沉淀劑進行鹽析反應(yīng).在血清中加入硫酸銨,當飽和度為28%~33%時,優(yōu)球蛋白析出;33%~55%時,擬球蛋白析出;飽和度大于50%
后,白蛋白析出,這是硫酸銨分析沉淀血清蛋白的一般規(guī)律[目前用硫酸銨制備IgG的一般步驟如下:取血清lO mL,與等量的生理鹽水混合,逐滴加入中
性飽和硫酸銨,使其飽和度為50%,室溫放置1 h后,離心取沉淀.沉淀用20 mL生理鹽水溶解后,逐滴加人中性飽和硫酸銨,使其飽和度為33%,室溫放置1 h后,離心取沉淀,沉淀用5 mL生理鹽水溶解,即為IgG粗制品,然后將上述IgG粗制品,于0.01 mol/L pH7.4的磷酸鹽緩沖液的大燒杯中透析約24 h,換液3~4次,至透析液中無硫酸根離子為止.要獲得較高純度IgG,一般還需再用DEAE一纖維素柱層析純化.該法技術(shù)含量高有經(jīng)濟意義,
且制得的IgG也有一定的經(jīng)濟價值C6].

 

  對外承攬試驗:免疫組化,熒光,Tunel,Elisa,WB

原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,!     (北京雅安達生物技術(shù)有限公司  了解更多詳細信息

 

 

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