研究開發(fā)N-磷酸化蛋白質(zhì)組深度覆蓋分析新方法

【資料簡介】

 

近日，中國大連化學(xué)物理研究所生物分子高效分離與表征研究組研究員張麗華和中科院院士張玉奎團(tuán)隊(duì)，發(fā)展出N-磷酸化肽段高選擇性富集新方法，并結(jié)合肽段的高效分離和高靈敏度鑒定，實(shí)現(xiàn)了N-磷酸化蛋白質(zhì)組的深度覆蓋分析。

 

與研究相對(duì)深入的發(fā)生在、和側(cè)鏈氨基上的蛋白質(zhì)O-磷酸化修飾相比，發(fā)生在蛋白質(zhì)、和賴氨酸上的N-磷酸化修飾，由于P-N酰胺鍵具有較高的吉布斯自由能，且易發(fā)生水解，目前仍缺乏有效的N-磷酸化蛋白質(zhì)組分析方法，制約了人們對(duì)其生物學(xué)功能的認(rèn)識(shí)。

 

該團(tuán)隊(duì)研制出具有核殼結(jié)構(gòu)的亞二微米硅球，并通過在硅球表面鍵合雙二甲基吡啶胺雙鋅分子，在中性條件下實(shí)現(xiàn)了N-磷酸化肽段的高效、高選擇性、快速富集；通過基于該材料的on-tip富集方法和液質(zhì)聯(lián)用分離鑒定的結(jié)合，從HeLa細(xì)胞中鑒定到3384個(gè)N-磷酸化位點(diǎn)（目前大的哺乳動(dòng)物N-磷酸化數(shù)據(jù)集），并發(fā)現(xiàn)N-磷酸化位點(diǎn)附近高度表達(dá)；建立的N-磷酸化蛋白質(zhì)組分析新方法為深入研究其生物學(xué)功能提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，并為推動(dòng)醫(yī)學(xué)、合成生物學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展提供了技術(shù)支撐。