血清樣本是zui常用于ELISA樣本，血漿一般可視為與血清同等標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，下面是實(shí)驗(yàn)中常見的內(nèi)源性物質(zhì)引起的結(jié)果出錯(cuò)，及解決方法：

內(nèi)源性物質(zhì)

      在血清標(biāo)本中有40%的人血清中含有非特異性干擾物質(zhì)，它在不同程度影響測定結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。

      (1) 類風(fēng)濕因子(RF)

      人血清中IgM、IgG型RF可以與ELSIA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的 FC 段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽性。

解決這個(gè)問題的方法有：

      ① 用 F(ab)2 替代完整的 IgG；

      ② 標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63°C，10 min）IgG 的固相吸附劑處理（將熱變性 IgG 加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效）；

      ③ 檢測抗原時(shí)，可以用2-巰基乙醇等加入到標(biāo)本稀釋液中，使 RF 降解。

      (2) 補(bǔ)體 ELISA 系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其 FC 段的補(bǔ)體 C1q 分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來，使 C1q可以將二者連接起來，從而造成假陽性。

解決的辦法是：

      ① 用 EDTA 稀釋標(biāo)本；

      ② 用 53°C，10 min 或 56°C，30 min 加熱血清使C1q滅活。

      (3) 嗜異性抗體  人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物（如鼠等）Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將 ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來，也能造成假陽性。

解決的辦法是：可在標(biāo)本稀釋液中加入過量的動(dòng)物 Ig (s) ，但加入量不足或亞類不同時(shí)無效。

      (4) 嗜靶抗原的自身抗體  抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體，有時(shí)能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在 ELISA 方法中均可干擾抗原抗體測定結(jié)果。

解決的辦法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定。

      (5) 醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體  臨床開展的用鼠源性 CD3等單克隆抗體治療，用放射性同位素標(biāo)記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術(shù)，均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體；另外，被鼠等嚙齒類動(dòng)物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠 Ig (s) 抗體。這些病人 ELISA測定時(shí)均可產(chǎn)生假陽性。

解決的辦法是：測定抗原時(shí)，在標(biāo)本中加入足量的正常鼠 Ig (s) ，從而克服由于上述原因造成的假陽性。

      (6) 交叉反應(yīng)物質(zhì)  類地高、類 AFP 樣物質(zhì)等，是與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。在用多抗測定抗原時(shí)對(duì)測定結(jié)果影響不大，但在用單克隆抗體測定抗原時(shí)，如果交叉抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對(duì)應(yīng)的靶決定簇時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

      (7) 標(biāo)本中其它成分的影響  血清脂質(zhì)過高、*、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對(duì) ELISA 測定結(jié)果有干擾作用。