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上海隆壘生物科技有限公司

人cAMP反應元件結(jié)合蛋白(CREB)酶聯(lián)免疫分析

時間:2013-3-15閱讀:339
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cAMP反應元件結(jié)合蛋白(CREB)酶聯(lián)免疫分析
 
試劑盒使用說明書
 
本試劑盒僅供研究使用。
 
檢測范圍:                                                     96T
20pg/ml-480pg/ml
 
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB)
含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB)水平。用
純化的人cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗
的微孔中依次加入cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB),再與HRP 標記的cAMP 反應元件結(jié)
合蛋白(CREB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB
顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定
吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人cAMP 反應元件結(jié)合蛋白(CREB)濃度。

 

計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月__

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