實驗原理：
BCA（bicinchoninic acid）法蛋白濃度定量：在堿性環(huán)境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+（biuret reaction）。BCA與Cu1+結合形成穩(wěn)定的紫藍色復合物，在562 nM處有高的光吸收值并與蛋白質濃度成正比，據此可測定蛋白質濃度。
產品特點
1.步驟簡單，45分鐘內完成測定，比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2.靈敏度高，檢測濃度下限達到25μg/ml，zui小檢測蛋白量達到0.5μg，待測樣品體積為1-20μl 。
3.BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質的影響，可以兼容樣品中高達5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
4.在20-2000μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。
5. 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
實驗步驟：
1. 先將solutionA 搖晃混勻，根據樣品數量，按50體積solution A加1體積solutionB試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻。BCA工作液在24小時內穩(wěn)定。
2.稀釋標準品：*溶解蛋白質標準品（5mg/mlBSA,-20℃保存）取10微升用PBS稀釋至100微升（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為 0.5mg/ml。
將稀釋后的標準品（0.5mg/ml）按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升分別加到96孔板的蛋白標準品孔中，加標準品稀釋液補足到20微升。
3.加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中，加標準品稀釋液不足道20ul。
即：將蛋白質樣品作適當稀釋（多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋。
4.在 各孔中加入200微升BCA工作液，這時使用加樣槍輕柔吹打，將其中液體混勻，這時請注意，盡量小一點力氣輕柔一點，不要弄出很多氣泡，這樣會影響讀數），然后再37℃室內放置30-60min。將液體冷卻至室溫，在酶標儀上測定A562nm，或540-590nm之間的波長的吸光值，zui后可根據標準曲線計算出蛋白質的濃度，為樣品蛋白質定量。
