蛋白藥物的PEG修飾類型

    根據(jù)化學(xué)修飾劑與蛋白質(zhì)之間反應(yīng)性質(zhì)的不同，修飾反應(yīng)主要分為酰化反應(yīng)、烷基化反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)、芳香環(huán)取代反應(yīng)等類型，對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行氨基、巰基和羧基等側(cè)鏈基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)修飾。

根據(jù)被修飾化合物包括蛋白質(zhì)、多肽、單克隆抗體分子片段、以及小分子化合物等的不同分子量大小、分子結(jié)構(gòu)以及其理化特性，公司采取不同的聚乙二醇化技術(shù)方法對(duì)這些化合物進(jìn)行修飾。修飾方法包括：

1．隨機(jī)修飾  
隨機(jī)修飾蛋白質(zhì)多以賴氨酸的ε-NH2或α-NH2為修飾目標(biāo)，由于賴氨酸在蛋白質(zhì)內(nèi)通常數(shù)量較多，這種修飾引起蛋白質(zhì)中多個(gè)賴氨酸被修飾，得到的產(chǎn)物是聚乙二醇化修飾異構(gòu)體的混合物，目前FDA批準(zhǔn)的已經(jīng)上市的聚乙二醇化新藥多數(shù)為隨機(jī)修飾的產(chǎn)物。

2. 定點(diǎn)修飾 
聚乙二醇化定點(diǎn)修飾，是在隨機(jī)修飾的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的第二代聚乙二醇修飾技術(shù)，通過(guò)對(duì)修飾方式、PEG修飾劑和反應(yīng)pH等的優(yōu)化選擇，實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)修飾，這種修飾所得的產(chǎn)物為均一產(chǎn)物，異構(gòu)體少，活性保留較好，免疫原性大大降低。

1） N端氨基定點(diǎn)修飾 
由于蛋白質(zhì)、多肽中存在多個(gè)α-NH2 和ε-NH2基團(tuán)，氨基的隨機(jī)修飾可能導(dǎo)致藥物活性的明顯下降，這給蛋白質(zhì)、多肽的修飾帶來(lái)了障礙。目前我們采取對(duì)N端氨基定點(diǎn)修飾，特別是對(duì)于遠(yuǎn)離活性中心的 N端定點(diǎn)修飾可以有效地保持藥物的原有生物活性。

2） 巰基定點(diǎn)修飾
結(jié)合基因工程技術(shù)或Mutagenesis等方法，將巰基或一些特異性基團(tuán)引入到蛋白、多肽預(yù)設(shè)位點(diǎn)（如不影響活性的糖基化位點(diǎn)、抗原決定簇等）后，再進(jìn)行對(duì)該基團(tuán)的修飾，這樣就可得到活性保留較高和免疫原性降低的定點(diǎn)修飾產(chǎn)物。

3） 羧基定點(diǎn)修飾
采用帶酰肼活化基團(tuán)的聚乙二醇衍生物對(duì)蛋白質(zhì)、多肽進(jìn)行羧基基團(tuán)進(jìn)行修飾，同樣可以獲得定點(diǎn)的修飾產(chǎn)物。

4）酶催化修飾 
第三代的聚乙二醇化定點(diǎn)修飾技術(shù)，采用酶催化手段誘導(dǎo)聚乙二醇分子與蛋白質(zhì)、多肽等分子上特定的位點(diǎn)進(jìn)行定向修飾。此方法具有以下特點(diǎn)：1）不需要對(duì)原蛋白質(zhì)、多肽進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，保持原化合物的理化特性不變；2）定點(diǎn)修飾；3）工藝簡(jiǎn)單，容易大規(guī)?；a(chǎn)和質(zhì)量控制。