石蠟切片法實例（一）
—蘇木精-伊紅對染法
一、目的要求
1、 熟悉石蠟切片的制作過程。
2、 掌握HE染色的基本原理和染色方法。
二、實驗原理
石蠟切片是zui基本的切片技術，冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發(fā)展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法（簡稱H.E.對染法）是組織切片zui常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛，對組織細胞的各種成分都可著色，便于全面觀察組織構造，而且適用于各種固定液固定的材料，染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色，細胞核被蘇木素染成藍紫色，細胞質被伊紅染色呈粉紅色。
三、實驗用品
（一） 器材
切片機，切片刀，溫臺，恒溫箱，*，鑷子，剪刀，解剖針，單面刀片，小臺木，灑精燈，包埋紙盒，染色缸，燒杯，水盆，熔蠟爐，蠟杯。
（二） 試劑
卡諾（Carnoy）固定液，埃利希蘇木精染液，1%伊紅酒精溶液，1%鹽酸乙醇液，各級酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，甘油蛋白粘片劑，中性樹膠。
試劑配法：
1、卡諾氏固定液：
100%酒精3份
冰醋酸 1份
或：100%酒精6份
氯仿 3份
冰醋酸 1份
2、埃利希蘇木精染液的配法：
蘇木精 1g
純酒精 50ml
冰醋酸 5 ml
甘油 50 ml
鉀礬（硫酸鋁鉀）約5g（飽和量）
蒸餾水 50 ml
配法：
ⅰ、將蘇木精溶于約15 ml的純酒精中，再加冰醋酸后攪拌。
ⅱ、當蘇木精溶解后即將甘油倒入并搖動容器，同時加入其余的酒精。
ⅲ、將鉀礬在研缽中研碎并加熱，然后將它溶解于水中。
ⅳ、將溫熱的鉀礬溶液一滴一滴地加入上述染液中，并隨時攪動。
ⅴ、此液混合完畢，將瓶口用一層紗布包著小塊棉花塞起來，放在暗處通風的地方，并經(jīng)常搖動以促進它的成熟。成熟時間約3~4周。若加入0.2g碘酸鈉，可立刻成熟。此液穩(wěn)定而染色均勻，染核效果良好，不會發(fā)生沉淀，長期貯備無妨。此液可分別與伊紅等進行二重染色。