因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測(cè)試劑)殘留在微孔板中，ELISA試劑盒那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高，而您懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

  如果您一直被所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面ELISA試劑盒、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。

 zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%)，ELISA試劑盒它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。

四、注意事項(xiàng)：

1. 待檢標(biāo)本如為血清，應(yīng)采用一次性容器，血液采集后盡快(6小時(shí)以內(nèi))分離血清。

2. 封閉液或抗體稀釋液應(yīng)新鮮配制或凍存。