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聯(lián)系人：陳剛
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中國科大揭示染色體復(fù)制叉停滯重啟的引發(fā)體組裝新模式
點(diǎn)擊次數(shù)：999 發(fā)布時(shí)間：2014-9-25
近日，中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)滕脈坤教授和李旭博士研究組在大腸桿菌DNA損傷修復(fù)過程中重要組件引發(fā)體蛋白DanT與單鏈DNA復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)中，發(fā)現(xiàn)了一種全新的三螺旋束與單鏈DNA的結(jié)合模式，闡明了DanT與單鏈DNA之間的相互識(shí)別分子機(jī)制。7月22日Nucleic Acids Research 在線發(fā)表了該研究成果，論文的*作者為課題組博士生劉崢。
遺傳信息的忠實(shí)可靠傳遞離不開細(xì)胞對(duì)染色體復(fù)制過程的協(xié)同調(diào)控，其中，復(fù)制起始階段的復(fù)制復(fù)合物組裝過程通常由引發(fā)體負(fù)責(zé)調(diào)控。引發(fā)體通常由多種蛋白組裝而成，包括解旋酶、引發(fā)酶和其他一些用于生成RNA引物（與單鏈DNA結(jié)合）的輔助蛋白。引發(fā)體的組裝對(duì)正常的染色體復(fù)制和復(fù)制叉停滯后的DNA損傷修復(fù)過程而言都是必須的。大腸桿菌中，存在兩套引發(fā)體分別負(fù)責(zé)上述兩方面的功能，其中，PriA-PriB-ssDNA-DnaT引發(fā)體復(fù)合物主要負(fù)責(zé)啟動(dòng)復(fù)制叉停滯后的DNA損傷修復(fù)過程。結(jié)合復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)及負(fù)染電子顯微鏡照片結(jié)果，研究人員發(fā)現(xiàn)DnaT蛋白可以和單鏈DNA組裝形成核蛋白細(xì)絲，這一發(fā)現(xiàn)提示DnaT蛋白可能在PriA依賴的引發(fā)體組裝過程中起到“腳手架”作用。結(jié)合生物化學(xué)分析，研究人員提出了PriA-PriB-ssDNA-DnaT引發(fā)體復(fù)合物可能的組裝模型以及DnaT蛋白在該引發(fā)體組裝及復(fù)制叉停滯重啟過程中所發(fā)揮的功能。
該研究結(jié)果對(duì)于揭示大腸桿菌引發(fā)體PriA-PriB-ssDNA-DnaT復(fù)合物組裝程序及DnaT蛋白在該過程中發(fā)揮的具體作用具有重大意義，為理解引發(fā)體組裝機(jī)理及復(fù)制叉停滯后的DNA修復(fù)啟動(dòng)機(jī)制提供了重要的理論依據(jù)。