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BMC Genomics:鑒定蟹卵巢小RNA組

點(diǎn)擊次數(shù):845 發(fā)布時間:2014-7-26

microRNA(miRNA)是非編碼小RNA分子,與靶信使RNA(mRNA)的3'-非翻譯區(qū)(UTR)堿基配對,下調(diào)基因表達(dá)。然而,關(guān)于十足目甲殼動物miRNA的詳細(xì)信息并不多見。上海海洋大學(xué)邱高峰教授帶領(lǐng)的團(tuán)隊早期研究發(fā)現(xiàn),中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的細(xì)胞周期蛋白B(cyclin B)的3'-UTR上存在許多miRNA結(jié)合位點(diǎn),暗示miRNA可能在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控細(xì)胞周期蛋白B。在本研究中,邱教授團(tuán)隊采用測序技術(shù)對中華絨螯蟹的卵巢小RNA組進(jìn)行了全面鑒定,深入探討了miRNA在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的作用*,研究成果發(fā)表在7月刊的BMC Genomics上。

研究人員采用高通量測序?qū)χ腥A絨螯蟹的卵巢小RNA組進(jìn)行分析(小RNA測序項目由聯(lián)川生物承擔(dān)完成),鑒定出來自44個miRNA家族的55個已知miRNAs,并預(yù)測出136個可能存在未知的miRNAs。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),四個miRNAs(miR-2,miR-7,miR-79和miR-133)的5'種子序列,互補(bǔ)于細(xì)胞周期蛋白B的3'-UTR的miRNA結(jié)合位點(diǎn)。實(shí)時定量PCR分析發(fā)現(xiàn),miR-2和miR-133表達(dá)豐度在減數(shù)*次分裂中期(MI)的表達(dá)豐度遠(yuǎn)高于胚泡期(GV)。但它們的表達(dá)增強(qiáng)不依賴于*釋放激素(GnRH)的誘導(dǎo)。研究人員采用雙熒光素酶報告基因測定法進(jìn)行進(jìn)一步表達(dá)分析,結(jié)果顯示miR-2和miR-133可下調(diào)螃蟹細(xì)胞周期蛋白B基因的3'-UTRs的表達(dá),這表明它們能抑制細(xì)胞周期蛋白B的翻譯。免疫印跡試驗(yàn)分析證實(shí),在受精卵中,細(xì)胞周期蛋白B蛋白會在減數(shù)*次分裂的中期—后期過渡中*消失,這表明了在接近MI結(jié)束時miR-2和miR-133可能具有破壞細(xì)胞周期蛋白B的功能。
此研究中從蟹卵巢小RNA組中鑒定出了大量的miRNAs,同時發(fā)現(xiàn)miR-2和miR-133在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中表現(xiàn)出差異表達(dá),并可以調(diào)控蟹細(xì)胞周期蛋白B基因的3'-UTR。值得注意的是,該研究發(fā)現(xiàn)與zui近報道的miRNA活性在小鼠卵母細(xì)胞中被整體抑制是不一致的。
* Song YN, Shi LL, Liu ZQ, Qiu GF. Global analysis of the ovarian microRNA transcriptome: implication for miR-2 and miR-133 regulation of oocyte meiosis in the Chinese mitten crab, Eriocheir sinensis (Crustacea:Decapoda) (2014) BMC Genomics doi: 10.1186/1471-2164-15-547 
聯(lián)川生物為研究人員提供從miRNA發(fā)現(xiàn)到靶基因鑒定的全程解決方案

聯(lián)川生物總部位于美國休斯敦(LC Sciences, LLC),經(jīng)過多年的快速發(fā)展,已成為業(yè)界的多組學(xué)技術(shù)服務(wù)商。公司擁有具有自主知識產(chǎn)權(quán)的µParaflo®微流體定制化芯片平臺,可以為科研用戶提供從基因組,轉(zhuǎn)錄組,到蛋白組的高通量定制化表達(dá)譜芯片解決方案。我們是提供microRNA表達(dá)譜芯片分析的服務(wù)商。作為早提供高通量測序技術(shù)服務(wù)的公司之一,聯(lián)川生物擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊和*的生物信息學(xué)專家組,可以為研究人員提供多組學(xué)測序服務(wù)和深度個性化數(shù)據(jù)分析解決方案。為滿足研究人員跨組學(xué)高通量研究需求,聯(lián)川生物已將蛋白質(zhì)組定量分析引入技術(shù)服務(wù)線,為用戶提供貫穿中心法則的全程解決方案。多年來,聯(lián)川生物一直與國內(nèi)的科研團(tuán)隊保持著長期緊密的合作,助力科研人員在生物、醫(yī)學(xué)、和農(nóng)林領(lǐng)域的科學(xué)發(fā)現(xiàn)。科研用戶使用聯(lián)川生物的科研服務(wù)和高質(zhì)量組學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已發(fā)表了逾600篇高水平研究論文,其中已在Cell,Nature,Science系列*期刊上發(fā)表論文十七篇。

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