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血液細胞（血常規(guī)）檢驗注意事項
點擊次數(shù)：1084 發(fā)布時間：2010-6-30
血細胞檢驗是指對血液中白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血小板（PLT）、血紅蛋白（HGB）及相關(guān)數(shù)據(jù)的計數(shù)檢測分析，也稱血常規(guī)檢驗。血常規(guī)檢驗不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù)，而且對其它系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供許多重要信息，是臨床醫(yī)學檢驗中zui常用、zui重要的基本內(nèi)容之一。血常規(guī)檢驗的zui原始的手段是通過顯微鏡人工鏡檢，隨著基礎(chǔ)醫(yī)學的發(fā)展，高科學技術(shù)的應用，*已成為取代鏡檢進行血常規(guī)分析的重要手段，尤其是帶分類的*。
無論是鏡檢、還是使用*，要獲得血常規(guī)檢驗的穩(wěn)定可靠、準確的數(shù)據(jù)，防止臨床診療人出錯誤的判斷，實驗室檢驗要充分考慮影響血常規(guī)檢驗中的多種影響因素，并嚴格加以控制：
一、標本的采集
為了取得準確、可靠的檢驗結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標本。高質(zhì)量的標本是高質(zhì)量檢驗的*步。保證血液標本中各項細胞的完整形態(tài)是作為血常規(guī)檢驗用的高質(zhì)量的標本的zui基本的要求。血液細胞檢驗標本的制備分為采集和抗凝2個步驟。
1.標本的采集
按采血部位的不同，取得血常規(guī)檢驗標本，zui常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細血管采血。各類文獻均表明，靜脈血血樣是zui可靠的標本，手指血是末梢毛細血管血樣中與靜脈血差異zui小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明，與靜脈血相比，手指血的準確性和可重復性仍然較差：白細胞計數(shù)明顯高（+8%）而血小板計數(shù)明顯低（-9%）。因此，絕大多數(shù)專家建議：血常規(guī)檢驗特別是應用*時，應使用靜脈血。
2.標本的抗凝
用于血常規(guī)檢驗的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理，在目前的眾多抗凝劑中，EDTA鹽（EDTA-Na2，EDTA-K2，EDTA-K3）是對白細胞形態(tài)和血小板影響相對較小的抗凝劑，用于血常規(guī)檢驗。除采血因素的影響（生理性因素、采血部位等）外，多數(shù)情況下，血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時，由于抗凝劑相對不足，血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加，在用于*時，微凝血塊可能阻塞儀器，同時影響一些檢驗指標。血液比例過低，抗凝劑相對過剩，對檢驗指標會造成嚴重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后，白細胞的形態(tài)會發(fā)生改變，這種改變和時間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的*濃度（與血液比）為1.5mg/ml，如果血樣少，EDTA的濃度達到2.5mg/ml，中性粒細胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片，這些改變都會使血常規(guī)檢驗和血細胞計數(shù)得出錯誤結(jié)果。這一點在用自動*時尤為重要。
靜脈血和末梢血均可經(jīng)抗凝劑抗凝成全血標本（標本中不含稀釋液，或?qū)吮驹斐傻南♂尩挠绊憳O?。?，顯而易見，末梢血抗凝標本要達到合適的血液和抗凝劑的比例是非常困難的。因此，多數(shù)專家建議，在制備全血比例是非常困難的。因此，多數(shù)專家建議，在制備全血標本時，應使用定量的含EDTA鹽的真空*采集靜脈血。
無論鏡檢，或是使用*，由于絕大多數(shù)的對標本稀釋的稀釋液中含有抗凝劑，在一定量的稀釋液中可直接加入微量靜脈血或末梢血液（10-40μl）即可制備成通常所說的預稀釋標本。多數(shù)情況下，預稀釋標本的制備適用于末梢血的血樣。
二、標本的稀釋
血液是由血細胞和血漿兩部分組成的紅色粘稠混懸液。在進行血細胞檢驗計數(shù)時，直接用血液計數(shù)是困難的，無論是鏡檢還是用*，血液均需合適準確的稀釋后才能進行血細胞的檢驗計數(shù)。基于*的基本原理，在*的設(shè)計應用中，稀釋倍數(shù)和計數(shù)容量是zui重要的設(shè)計指標之一。
自50年代初，美國庫爾特研制了電阻法（小孔原理）*以來，血細胞的稀釋液為介質(zhì)的流動的形式通過傳感器測量計數(shù)（如圖-1），血細胞通過傳感器時一定需要排隊通過，否則可能就會造成重合損失（如圖-2）。
實際應用時，是將血液稀釋于稀釋液中形成稀釋標本（稀釋比為1：N），以流動檢測的方式測出一定量（V）的稀釋標本內(nèi)的血細胞數(shù)（T），經(jīng)換算后得出血液中的細胞濃度（L）：L-T×N/V.
由此可見，準確合理的稀釋倍數(shù)（在用于儀器時，RBC、PLT的稀釋倍數(shù)一般為1：10000至1：3000；WBC、HGB的稀釋倍數(shù)一般為1：250左右）和準確、穩(wěn)定的測量容量是血細胞檢測的又一重要基礎(chǔ)。稀釋倍數(shù)過低，會形成細胞排隊通過傳感器的重合缺損；稀釋倍數(shù)過大，則會造成一定測量容量內(nèi)血細胞的數(shù)量過少，這都會嚴重影響血液細胞檢驗的測量精度。
三、標本的儲存
如前文所述，抗凝劑因時間和濃度的不同，會造成對血細胞形態(tài)的影響。有研究表明，用EDTA抗凝靜脈血標本，在標本收集后的5分鐘內(nèi)或30分鐘后，8小時內(nèi)（室溫）檢測，可以得到*的檢測結(jié)果。如果不需要血小板和白細胞分類的準確數(shù)據(jù)，則標本可以在2℃-8℃的條件下存入至24小時。
預稀釋標本一般需要在標本制備后10分鐘內(nèi)予以測量；如果稀釋液中添加細胞穩(wěn)定劑，預稀釋標本的存放時間也不可超過4小時。
總之，影響血常規(guī)檢驗結(jié)果的因素很多，要想取得準確的檢驗數(shù)據(jù)，就要在實驗的每一個步驟中都嚴格按照操作規(guī)程進行。本文所講述的內(nèi)容，僅僅是對血常規(guī)檢驗中注意事項的部分總結(jié)，可能存在的不足和缺陷，還是請常年處于臨檢一線工作中的老師們批評、指正。