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細胞生長曲線的測定 這些問題你遇到過嗎?

時間:2017/4/11閱讀:3377
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細胞生長曲線的測定 這些問題你遇到過嗎?

1、 問:測定細胞生長曲線的意義是什么?

答:細胞生長曲線是測定細胞生長數(shù)的常用方法,也是判定細胞活力的重要指標,是培養(yǎng)細胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因為細胞太小,無法測單個細胞的生長狀態(tài),所以測細胞群體的生長曲線。

2、 問:如何選擇細胞接種數(shù)?

答:可根據(jù)細胞傳代培養(yǎng)過程中接種數(shù)及細胞生長周期進行計算,細胞接種數(shù)因細胞的不同而不同。

3、細胞計數(shù)時為什么要用臺盼藍染色?

答:加入臺盼藍后,活細胞不著色,臺盼藍著色的細胞呈深藍色,是不健康或已死亡的細胞,不能計數(shù)。

4、細胞生長曲線測定時為什么要做重復(fù)孔?

答:測定細胞生長曲線細胞計數(shù)時選擇 3 個復(fù)孔,每孔分別計三次,取其平均值,目的是減小操作誤差。

5、細胞生長曲線測定周期是幾天?

答:一般是一個星期。

6、為什么繪制的細胞生長曲線沒有達到平臺期?

答:可能有以下原因:一是細胞接種密度過低;二是細胞培養(yǎng)時間過短;三是細胞生長狀態(tài)不好,使其不能正常增殖。

7、為什么細胞計數(shù)*天,細胞數(shù)沒有增加反而減少?

答:一般細胞傳代后,會有一個生長緩慢的潛伏期,細胞不增殖,而細胞會有正常的死亡,故細胞數(shù)不增加反而減少。

8、細胞生長曲線還有其他方法繪制嗎?

答:當(dāng)然有。我們提到zui多的是直接計數(shù)的方法,除此以外還有相對計數(shù)的方法,該類方法首先要繪制標準曲線,標定細胞數(shù)和某個變量的函數(shù)關(guān)系,然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計算出細胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。

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