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液相色譜儀測定糧食中玉米赤霉烯酮及其代謝物

閱讀:1086發(fā)布時(shí)間:2017-6-28

玉米赤霉烯酮是由粉紅鐮刀菌和其它鐮刀菌產(chǎn)生的一種激素類真菌毒素??梢鸶鞣N谷物病變,主要發(fā)生在玉米、高粱、燕麥、小麥、大麥及谷子等農(nóng)作物中。研究表明,玉米赤霉烯酮(ZON)及其代謝物(α-zearalenol,β-zearalenol)具有類雌激素作用,能導(dǎo)致動(dòng)物雌激素水平過高及嚴(yán)重的生殖和不育問題。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明:玉米赤霉烯酮有致癌活性 ,ZON、α-ZOL和β-ZOL是否對(duì)人體也有潛在致癌性正在研究中。玉米赤霉烯酮污染飼料和食品后,不僅使農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)受到嚴(yán)重影響,而且還會(huì)帶來嚴(yán)重的食品安全問題,威脅到人類的健康。我國目前尚未制定食品中玉米赤霉烯酮的zui大允許*及標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。澳大利亞、法國和俄羅斯等已經(jīng)制定了食品和動(dòng)物飼料中玉米赤霉烯酮的zui大允許*為30~1000μg/kg 。

實(shí)驗(yàn)采用甲醇-水提取樣品,經(jīng)二氯甲烷萃取后,C18硅膠小柱固相萃取,直接熒光檢測,液相色譜同時(shí)測定玉米赤霉烯酮等多種真菌毒素。

 

儀器設(shè)備:

LC600B等度液相色譜儀(帶熒光檢測器)

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式,增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測、化工分析、監(jiān)測等眾多分析領(lǐng)域。

 

樣品處理

以市售玉米面、面粉和針對(duì)性采摘的麥粒麥穗等為樣品,經(jīng)粉碎混勻后,稱取10.0g 樣品置于100mL容量瓶中,加30mL甲醇,50g/L NaCl溶液20mL,振搖5min后,超聲提取30min,用濾紙過濾到分液漏斗中,加入二氯甲烷萃取(分3次,每次20mL),二氯甲烷層經(jīng)*脫水并收集于蒸發(fā)皿內(nèi),于恒溫水浴(50±1℃)上揮干溶劑。用6mL甲醇2水(40∶60)分3次溶解殘?jiān)?轉(zhuǎn)入C18小柱后,用4mL甲醇洗脫,收集洗脫液于具塞刻度離心管中,用氮?dú)獯抵?.0mL,以3000r/min,離心5min,取上清液進(jìn)樣測定。以保留時(shí)間定性,峰高增量法確認(rèn),標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。

 

色譜條件

色譜柱

Phenomenex ODS C18柱,25cm×4mm,5μm

流動(dòng)相

水-甲醇-乙腈(46∶10∶44,V/V)

流速

1.0mL/min

熒光檢測器工作波長

λem=236nm;λem=418nm

柱溫

25℃

 

譜圖分析:

 

1.β-玉米赤霉烯醇);         2.α-玉米赤霉烯醇;

3.黃曲霉毒B1;           4.玉米赤霉烯酮

 

 

 


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