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小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒

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更新時間:2021-12-23 10:16:22瀏覽次數(shù):543次

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小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
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試劑盒名稱:小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
規(guī) 格:48T/96T
品牌:進(jìn)口原裝/分裝/國產(chǎn)
產(chǎn)品的用途:僅供科研究使用!
價格:電議,咨詢在線客服,或者以郵件形式發(fā)到我司qysw@qiyibio.com。齊一生物科技(上海)有限公司提供大量品牌進(jìn)口原裝、以及穩(wěn)定性強的國產(chǎn)ELISA試劑盒,性價比*。歡迎您前來選購!
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加*標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl*標(biāo)記抗體加99μl*標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同*標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、*標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、*標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒注意事項
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒其它產(chǎn)品水蛭(螞蟥)    121061-200904    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
芫花    121062-200602    中檢所    2g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
槐花    121063-200702    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
羚羊角    121064-0301    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
川牛膝    121065-201004    中檢所    2g    TCL法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
牛膝    121066-200504    中檢所    1.0g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
蘇木    121067-200604    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
杜仲葉    121068-9901    中檢所    5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
忍冬藤    121069-201004    中檢所    2g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
知母    121070-200804    中檢所    3g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
狗脊    121071-200903    中檢所    2g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
枸杞子    121072-201008    中檢所    0.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
胡黃連    121073-200602    中檢所    0.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
萊菔子    121074-201003    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
桑寄生    121075-201003    中檢所    5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
救必應(yīng)    121076-200602    中檢所    4.0g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
積雪草    121077-200602    中檢所    1.2g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
五倍子    121078-200402    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
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澤瀉    121081-200603    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
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棉花根    121083-200502    中檢所    1.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
藏菖蒲    121084-201003    中檢所    2g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
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金蓮花    121089-200903    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
土木香    121090-201002    中檢所    0.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
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赤芍    121093-200402    中檢所    0.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
王不留行    121094-201004    中檢所    1.5g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
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烏藥    121096-201004    中檢所    1g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書
火麻仁    121097-200703    中檢所    2.0g    TLC法鑒別    齊一生物    詳細(xì)見說明書

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