中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物

For Research Use only

僅供研究用

貨號：QYS-236035

微量法 100管/96樣

注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物測定意義

*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷，土

壤中*磷是限制植物生長主要因子之一。

測定原理

用弱堿法提取酸溶性磷和吸附態(tài)磷，鉬藍(lán)與磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定660nm 光吸收，即可計算磷含量。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液：液體 125mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入 5mL 雙蒸水，溶解后 4℃保存一周。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入 5mL 雙蒸水，溶解后 4℃保存一周。

試劑三：液體 5mL×1 瓶，室溫保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：10μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 1mL×1 支，4℃保存。工作液：35mL 棕色空瓶×1 瓶。

工作液（定磷劑）的配制：按 H2O：試劑一：試劑二：試劑三=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液應(yīng)為淺黃色。若變色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染，工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意：配試劑用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

樣本處理

新鮮土樣風(fēng)干，過 30-50 目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：20 的比例（建議

稱取約 0.05g 土樣，加入 1mL 提取液），振蕩提取 1h，10000g  ，25℃離心 10min，取上清液待測。

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物測定步驟

1、 測定步驟：

1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 660nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 將 10μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋為 6、4、2、1、0.5、0.25μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

3、 操作表：(在 1.5mL 離心管中或 96 孔板依次加入下列試劑)

計算公式

1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為 x 軸，其對應(yīng)的△A 標(biāo)準(zhǔn)為 y 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b， 將△A 帶入方程得到 x（μmol/mL）

2、 *磷含量的計算：

*磷含量（μmol /g 鮮重）=x×V 樣÷（V 樣×W÷V 樣總）=x÷W。

V 樣：加入樣本體積，0.02mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意事項

1. 配好的顯色液當(dāng)天用完，變藍(lán)則不能使用。

2. 低檢出限為 0.2μg/mL。

中性、堿性土壤*磷試劑盒說明書齊一生物注：電子版說明書僅供參考、詳情請參考試劑盒紙質(zhì)版說明書。