大鼠磷酸肌醇3激酶（PI3K）ELISA試劑盒特性
◎選擇正規(guī)廠家，產(chǎn)品經(jīng)相應政府部門審核認可，試劑應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
◎靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性：常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應，使測定結果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
◎精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。
◎準確度：通過添加回收實驗進行評價。
◎簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性實驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。
◎安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟性：試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術進步降低成本，而市場價格比較合理。
◎試劑評價：需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。
操作程序總結
準備試劑，樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品，37℃反應30分鐘
洗板5次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘
洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色10分鐘
加入終止夜
15分鐘內(nèi)讀OD值

大鼠磷酸肌醇3激酶（PI3K）ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的AC-1標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的AC-1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。
5. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請避光保存。

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