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小鼠P-糖蛋白(P-gp)Elisa試劑盒

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更新時(shí)間:2016-06-01 20:50:38瀏覽次數(shù):292次

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蔣菲菲:
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上??ㄟ~舒生物用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μgml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml4過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。簡稱洗滌,下同。


  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37孵育1小時(shí)。然后洗滌。同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔。


  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37孵育0.51小時(shí),洗滌。


  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,371030分鐘。


  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。


  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

卡邁舒(上海)生物科技有限公司專業(yè)提供各種屬ELISA試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善,有提供免費(fèi)代檢測(cè)。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位。國內(nèi)外專業(yè)ELISA試劑供應(yīng)商,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

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