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可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),下面以“Curve Expert1.4”軟件為例,繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法如下;
1.啟動(dòng)“Curve Expert1.4”(Curve Expert1.4免費(fèi)下載.zip)
2.X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值,Y軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值,如圖:
3.單擊[運(yùn)行]
按鈕,出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框
4.單擊[ok]按鈕,出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話(huà)框,關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話(huà)框
5. 在對(duì)話(huà)框的右上角出現(xiàn)一些曲線(xiàn)的名稱(chēng),從“1”開(kāi)始依次點(diǎn)擊曲線(xiàn)名稱(chēng),在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線(xiàn)。
6. 根據(jù)擬合的曲線(xiàn)選取ELISA擬合度*的曲線(xiàn)雙擊,出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框:
注意:選擇系數(shù)(即“r”值)的曲線(xiàn)方程來(lái)進(jìn)行運(yùn)算。在下面的對(duì)話(huà)框
右上角有“r”值
,當(dāng)“r”值越接近1擬合度越好
7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現(xiàn)如下對(duì)話(huà)框:
8.輸入標(biāo)準(zhǔn)的OD值,單擊[Calculate]按忸,即可得到待測(cè)蛋白的實(shí)際含量(標(biāo)本稀釋了N倍,運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)在乘以N)。
9. 如想得到ELISA擬合曲線(xiàn)的方程,可在步驟6的對(duì)話(huà)框空白處右擊,選擇”Information”
10. 得到如下對(duì)話(huà)框:點(diǎn)擊“Copy”
在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):
Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
Coefficient Data:
a = -21.531017
b = 212.05019
c = -0.24054479
d = 0.018060778
請(qǐng)輸入賬號(hào)
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請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
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