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做PCR試驗(yàn)前需要的準(zhǔn)備

2013年11月05日 14:46:24人氣:365來源:北京方程生物科技有限公司

北京方程生物公司承接elisa實(shí)驗(yàn),PCR實(shí)驗(yàn)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

  1. 試驗(yàn)耗材(1.5mlEppendorf管,0.5 mlEppendorf管,1ml吸頭,200ul吸頭,10 ul吸頭)預(yù)先用0.1%DEPC水(取2ml DEPC加2000 ml水,搖勻,過夜,滅菌;DEPC是致癌劑,固須戴手套操作)浸泡過夜.然后用滅菌水淋洗,并于100℃烤干.

  2. 玻璃器具蒸餾水淋洗數(shù)次,150℃烘烤,4小時(shí)以上

  3. 一次性96孔聯(lián)體PCR反應(yīng)板及配套的透明粘模

  4. 75%乙醇的配置(1倍的DEPC處理水加3倍的無水乙醇)預(yù)冷.

  5. Trizol(預(yù)冷) (內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶)

  6. 蒸餾水, DEPC處理水

  7. 氯仿(預(yù)冷) (能將胞膜及胞壁部分結(jié)構(gòu)溶解使胞內(nèi)各種物資釋放出,并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶)

  8. 異丙醇(預(yù)冷) (異丙醇選擇性沉淀DNA而與在溶液中的RNA分離)

  9. PCR試驗(yàn)所需試劑盒組成(5×逆轉(zhuǎn)錄buffer,dNTPs,MMLV,DEPC處理水, 5×定量PCRbuffer,Taq酶, ddH2O,上游引物F,下游引物R,TaqMan probe)

  10. 試驗(yàn)前將生物安全柜UV及標(biāo)本處理間UV打開照射30分鐘.

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