RNA被證實在細胞中扮演許多重要角色，比如翻譯抑制者（miRNA），細菌防御者（CRISPR gRNA）以及很多病毒遺傳物質的傳遞者等，體外轉錄這項技術成為越來越多研究項目中*的部分。比如，通過轉錄反應獲得放射性同位素標記或非同位素標記的RNA探針可用于印跡雜交和核酸酶保護實驗，其中這類探針比隨機引物制備的DNA探針要靈敏很多；通過轉錄反應還可合成含修飾核苷酸的RNA轉錄本，用于各種生物化學和分子生物學研究。今天給大家安利一款特色的體外轉錄試劑盒，能夠獲得高質量RNA，一起來了解下吧~

AmpliScribe™T7-Flash™轉錄試劑盒經(jīng)過特殊配制，使用戶能夠在30分鐘內從體外轉錄反應中獲得zuigao產(chǎn)量的RNA。 標準的30分鐘，20μLAmpliScribe T7-Flash反應將從1μg線性對照DNA模板中產(chǎn)生160-180μgRNA。

AmpliScribe T7-Flash轉錄試劑盒可用于產(chǎn)生各種大小的RNA轉錄本（從<50>9 kb）。 標準的AmpliScribe T7-Flash反應也可以按比例放大，以在單個反應中產(chǎn)生毫克量的RNA。

優(yōu)點：

通過30分鐘的高產(chǎn)量方案節(jié)省時間

擴大反應以產(chǎn)生克級別RNA

組成成分：

T7 RNA Polymerase：120μL;Store only at –20°

10X Transcription Reaction Buffer：250μL;Store only at –20°

ATP (100 mM)：100μL;Store only at –20°

GTP (100 mM)：100μL;Store only at –20°

CTP (100 mM)：100μL;Store only at –20°

UTP (100 mM)：100μL;Store only at –20°

DTT (100 mM)：125μL;Store only at –20°

RiboGuard RNase Inhibitor (40 U/µL)：30μL;Store only at –20°

Nuclease-Free Water, Sterile：1.0mL;Store only at –20°

Control Template DNA (0.5 µg/µL) ：25μL;Store only at –20°

RNase-Free DNase I (1 U/µL)：60μL;Store only at –20°

1. Molecular Cloning - A Laboratory Manual, Third Edition, 2001. CSHL Press. pp 7.27 – 7.34.  J. Sambrook and D. Russell.

AmpliScribe™ T7 High Yield Transcription Kit
應用

• 從克隆至T7 RNA聚合酶啟動子下游的DNA高效合成RNA，用于顯微注射，RNA干擾，或反義實驗。

• 剪接、加工、異質核RNA、tRNA、病毒RNA和核酶的結構和功能研究。

• 產(chǎn)生熒光、生物su或洋地黃毒苷標記的RNA。

The AmpliScribe™ T7 High Yield Transcription Kit 試劑盒專門配制高濃度的NTP，可以抑制其它體外轉錄系統(tǒng)。相比傳統(tǒng)的體外轉錄反應，該試劑盒反應可以產(chǎn)生> 20倍的全長RNA轉錄產(chǎn)物。例如，使用1 µg模板DNA，在30-120分鐘內，該試劑盒可以產(chǎn)生大約5-7.5 mg/ml 1.4kb全長的對照RNA (Fig. 1).
好處

• 可以從所有的模板合成RNA——利用一個試劑盒既可以合成長的，也可以合成短的RNA。從1 ng的模板可以產(chǎn)生微克量級的RNA。

• 反應可以被放大產(chǎn)生毫克量的RNA。

• 產(chǎn)生>20倍的RNA量相比傳統(tǒng)和自制的體外轉錄反應。

• 含有RNase抑制劑。

注：：由于AmpliScribe反應使用非常高濃度的NTP，這些試劑盒不推薦用于制備高特異活性的fangshe性標記的RNA探針。